Détermination de la chitine chez les insectes

Les insectes sont la source alternative de protéines du futur. D'une part, parce qu'ils ont une bonne composition nutritionnelle en termes d'acides aminés, de minéraux et d'acides gras. D'autre part, ils ne nécessitent que peu d'eau et de surface pour leur culture et émettent donc relativement peu de CO₂.

Comme composant principal de leur exosquelette, les insectes contiennent le polysaccharide chitine, qui contient à son tour de l'azote. Lors de la détermination des protéines, cet azote contenu dans la chitine est comptabilisé comme protéine brute, ce qui augmente sa valeur totale. Mais comme l'azote de la chitine n'est pas assimilable par l'homme et l'animal, il doit être considéré séparément.

Pour déterminer séparément la teneur en chitine, C. Gerhardt a développé, en collaboration avec le Research Institute of Feed Technology (IFF), une technique d'analyse rentable et pratique basée sur des méthodes chimiques classiques. À savoir sur la détermination de la cellulose brute et de l'azote avec FIBRETHERM, KJELDATHERM et VAPODEST.

Préparation des échantillons et pesée :
Les échantillons doivent être homogènes pour l'analyse suivante. Les insectes frais doivent être séchés. Les insectes à forte teneur en graisse peuvent être congelés au préalable afin d'éviter qu'ils ne s'agglutinent lors de l'homogénéisation. Après la préparation des échantillons, peser environ 1 g par échantillon ainsi que le Glas Spacer et le FibreBag.

• Note d'application : si la teneur en graisse de l'échantillon est supérieure à 10 %, il est recommandé de dégraisser l'échantillon.

Hydrolyse alcaline et séchage :
Les échantillons sont placés dans le carrousel, puis le carrousel est placé dans le FIBRETHERM et la méthode est démarrée. Dès que la méthode du FIBRETHERM est terminée, les Glas Spacer et les FibreBags sont replacés dans les creusets. Les Glas Spacer sont rincés à l'eau distillée afin d'éliminer les éventuels résidus dans les FibreBags. Les creusets contenant les FibreBags sont séchés à 103 °C pendant 4 heures ou une nuit.

Détermination de l'azote selon Kjeldahl :

Ajout des produits chimiques :
Chaque FibreBag est placé dans un tube de minéralisation. Les produits chimiques correspondants sont ensuite ajoutés pour la minéralisation.

Minéralisation :
Les échantillons sont minéralisés dans le KJELDATHERM ou le TURBOTHERM avec les paramètres définis.

Distillation :
Après le refroidissement des échantillons, une distillation à la vapeur d'eau est effectuée avec le VAPODEST :

• Note d'application : lors de l'utilisation de nos KJELCATS, il est important d'observer un changement de couleur du bleu au brun après l'ajout de NaOH, ce qui indique que le NaOH a été ajouté en excès.

Titrage :
Ajoutez 3-4 gouttes de la solution indicatrice à la solution réceptrice et titrez avec la solution étalon jusqu'à ce que la couleur passe du vert au violet. Si vous déterminez le point final avec une électrode de pH, vous ne devez pas ajouter la solution indicatrice de pH.

Calcul :
La teneur en chitine peut être calculée à l'aide de l'équation suivante :

ꞷ_chitine = teneur en chitine [%]

V₁ = volume de la solution titrante utilisée pour l'échantillon [ml] 

V₀ = volume de la solution titrante utilisée pour l'essai à blanc [ml] 

c_eq;target = concentration équivalente de la solution titrante

t = titre de la solution titrante

20,319 = facteur pour le calcul de la teneur en chitine

m_sample = poids de l'échantillon dans le FibreBag [g]

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